Hormon testi uygulaması, standart olarak aç karnına yapılır. Ancak, bakılacak hormon değeri neticesinde nasıl yapılacağı değişiklik gösterebilir. Tiroit hormonu için özel bir zaman veya durum beklentisi yoktur. Kortizon ölçümü için, sabah 08.30 – 09.00 arası uygundur. Erkeklerde hormon testi, genellikle tükürük, kan yada idrar örneği alınarak yapılır.